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常见问题

    ABGENT产品

  1. 怎样才能订购或定制Abgent的抗体？
  2. 怎么知道我所要购买的抗体是多克隆抗体还是单克隆抗体？
  3. Abgent抗体是通过什么动物来制备的？
  4. 制备一个抗体时，Abgent通常使用什么抗原？
  5. 我能知道你们抗体的抗原信息吗？
  6. Abgent的磷酸化抗体会与非磷酸化的抗原发生反应吗？
  7. 你们如何测试抗体的效价？
  8. 如何在Western Blot检测时提高大分子量蛋白的转印效率？
  9. 在使用PVDF膜做Western Blot时，怎样消除背景？
  10. Western Blot检测中你们是如何区分特异性目标条带的？
  11. 怎样才能保证Western Blot实验的可重复性？
  12. 为什么我买的抗体Western Blot检测没有阳性结果？
  13. Abgent的抗体能否应用于全组织裂解液？
  14. 你们的IHC实验中是否进行抗原修复，条件是怎样的？
  15. 我想购买Abgent的抗体用于IP检测，但发现你们网站上没有该抗体的IP检测结果，请问该抗体能否用于IP检测，是否可以先提供一个小样免费给我们试用？
  16. Abgent的抗体产品以怎样的形式提供？
  17. Abgent能否提供不含有叠氮化钠的抗体？
  18. 我怎样才能获得返现或者其他奖励？
  19. 如果在我发表的文章中引用了Abgent的抗体产品，是否可以获得免费的抗体？

    20. ABGENT服务

  20. Abgent能提供怎样的多肽合成服务？
  21. 多肽合成服务中提供较长序列的多肽和环化的多肽合成吗？
  22. 多肽合成后是怎样进行纯化的？
  23. Abgent的多肽以怎样形式提供给客户？
  24. 我怎样溶解我拿到的多肽？
  25. 蛋白上的标签是否会影响抗体制备？
  26. 能否比较一下蛋白表达纯化时使用细菌和昆虫/病毒的区别？
  27. 如果我想提供抗原让Abgent制备抗体，需要提供多少抗原？
  28. 如果我想定制一个抗体，但我想让Abgent为我进行多肽设计，我想知道多肽设计是怎样进行的？
  29. 单克隆抗体制备项目中客户能获得不同克隆吗？
  30. 你们的抗体制备是否保证阳性结果？
  31. 在订单上，抗体的制备流程是固定期限的，我想缩短这个流程可不可以？
  32. 如果我想提前终止还未结束的多克隆抗体定制项目，费用如何计算？
  1. 怎样才能订购或定制Abgent的抗体？
    您可以通过电子邮件、电话、传真与我们联系，当然我们也欢迎您直接来我们公司进行交流。
    电子邮件：sales.abgent@wuxiapptec.com
    电话：+0512 69369088
    传真：+0512 69369089
  2. 怎么知道我所要购买的抗体是多克隆抗体还是单克隆抗体？
    我们的产品目录号提供了相关信息：AP表示多克隆抗体，AM和AT表示单克隆抗体。
  3. Abgent抗体是通过什么动物来制备的？
    我们的单克隆抗体都是通过BALB/c小鼠制备的，多克隆抗体都是通过新西兰兔制备的。客户抗体定制服务也是使用这两种动物。
  4. 制备一个抗体时，Abgent通常使用什么抗原？
    我们常规使用的抗原包括天然的蛋白、重组蛋白和合成多肽。如果合成多肽分子量小于8 kDa，需通过半胱氨酸的巯基将多肽偶联到KLH或BSA上。
  5. 我能知道你们抗体的抗原信息吗？
    如果您想了解我们抗原的详细信息，包括多肽序列，您可以通过电子邮件tech.abgent@wuxiapptec.com把您的需求告诉我们，我们会及时给您回复。
  6. Abgent的磷酸化抗体会与非磷酸化的抗原发生反应吗？
    不会，我们的磷酸化抗体都是依次经过对应的非磷酸化多肽和磷酸化多肽两步亲和纯化得到的，是磷酸化抗原位点特异性的，不会与非磷酸化抗原产生交叉反应。
  7. 你们如何测试抗体的效价？
    抗体效价通常用ELISA来检测，我们使用ELISA板条包被抗原并洗去未结合的抗原。在ELISA检测中我们使用的是未经偶联的多肽。逐步稀释的抗体被加入ELISA板孔内，并洗去未结合的抗体。最后加入标记的二抗，通过显色的数值反应抗体的效价。
  8. 如何在Western Blot检测时提高大分子量蛋白的转印效率？
    1. 增加转印时间。
    2. 在转印缓冲液中添加0.01%或0.02%的SDS以提高蛋白从胶中转出的效率。
    3. 减少转印缓冲液中甲醇的量。
    4. 使用低浓度的胶更利于转印。
  9. 在使用PVDF膜做Western Blot时，怎样消除背景？
    使用PVDF膜时需要经过多步严格的封闭过程。可以通过增加2-5倍封闭液的浓度，延长封闭时间（如封闭液孵育过夜）和在37℃下进行封闭来提高效果，通过封闭液与空位点结合来消除背景，并与膜蛋白结合降低其与一抗的非特异性结合。
    一些常用封闭液有脱脂奶粉，BSA和干酪素。
  10. Western Blot检测中你们是如何区分特异性目标条带的？
    多克隆抗体的Western Blot检测结果通常会出现多条带，我们通过对免疫后血清和免疫前血清的检测结果进行比较：在抗体和免疫后血清中都出现而免疫前血清中未出现，且符合预测分子量的条带，就可以认为是特异性的目标条带。
  11. 怎样才能保证Western Blot实验的可重复性？
    造成Wester Blot实验重复性差的因素很多，可以从以下几个方面考虑：
    1. 抗体的保存条件是否严格；
    2. 抗体稀释后工作浓度很低不能反复使用；
    3. 检测样品是否含有目标蛋白？细胞裂解液中的目标蛋白含量会因细胞数量、药物作用时间、细胞通道数量和储存条件不同而发生变化，导致检测结果的变化。
  12. 为什么我买的抗体Western Blot检测没有阳性结果？
    在Abgent的Western Blot实验流程中有一些细节是避免背景深和没有结果的关键。
    1. 不要过度清洗膜，膜的清洗使用含有0.1% Tween-20的TBS，3次，每次5分钟即可。过度的清洗可能会把一抗洗掉。合适的清洗条件能够很好的消除背景并得到最好的结果。
    2. 不要过长时间的封闭。过度的封闭会导致信号减弱。
    3. 请确认您所要检测的抗原是否是产品说明书上所列举的抗原种属。
  13. Abgent的抗体能否应用于全组织裂解液？
    我们并没有对我们的抗体进行全组织裂解液的测试，但有客户使用我们的一些抗体应用于全组织裂解液。
  14. 你们的IHC实验中是否进行抗原修复，条件是怎样的？
    我们的IHC实验中使用微波炉修复法，中高火，时间6-8分钟。
  15. 我想购买Abgent的抗体用于IP检测，但发现你们网站上没有该抗体的IP检测结果，请问该抗体能否用于IP检测，是否可以先提供一个小样免费给我们试用？
    该抗体确实没有进行过IP检测，但有WB或IHC的检测结果，对于有WB或IHC检测结果的抗体我们原则上不提供免费试用。
  16. Abgent的抗体产品以怎样的形式提供？
    纯化抗体保存在PBS中并加少量防腐剂；抗血清以原始的血清形式保存不添加防腐剂。抗体在-20℃下可保存数年。抗体需避免反复冻融，反复冻融可能会导致抗体蛋白的降解，建议使用前进行小样分装。
  17. Abgent能否提供不含有叠氮化钠的抗体？
    Abgent的抗体产品保存在含有0.09%(W/V)叠氮化钠的PBS溶液中。叠氮化钠是在纯化结束后立刻添加，因此我们很难提供不含叠氮化钠的抗体。最好的解决方法是通过透析或超滤去除叠氮化钠。
  18. 我怎样才能获得返现或者其他奖励？
    我们会对我们的抗体产品进行检测，获取好的检测数据提供给客户，使客户能使用最好的产品。但对于那些没有很好检测数据的产品，如果您愿意与我们分享您的检测结果，并提供数据给我们，您可以选择以下奖励：
    1. 免费或者以更优惠的价格获取我们的任何一个抗体产品。
    2. 50%现金返回。
    3. 免费与我们合作开发一个新的抗体产品。
  19. 如果在我发表的文章中引用了Abgent的抗体产品，是否可以获得免费的抗体？
    如果您发表的文章引用了Abgent的抗体产品，并愿意把相关信息提供给我们发布在网上，您可以从我们的产品目录中任意选择一支免费的抗体。具体情况请与我们的销售部门联系 ：sales.abgent@wuxiapptec.com。
  20. Abgent能提供怎样的多肽合成服务？
    我们能提供给客户不同量（通常3-30mg）、不同纯度（50-98%）的多肽。多肽的长度最多可以达到100个氨基酸，同时可以对多肽进行磷酸化、甲基化、乙酰化、生物素的修饰以及FITC、Rhodamine、TAMRA标记。
  21. 多肽合成服务中提供较长序列的多肽和环化的多肽合成吗？
    是的，我们能够提供长序列的或者环化的多肽合成。我们有丰富的经验合成长度达到100个氨基酸的多肽以及多肽的修饰。
  22. 多肽合成后是怎样进行纯化的？
    我们对多肽进行反相HPLC纯化，请您在确认多肽合成的订单时告知我们您的多肽纯度要求。
  23. Abgent的多肽以怎样形式提供给客户？
    所有的多肽都以冻干粉末形式提供，必须在-20℃条件下保存才能保证多肽长期稳定。使用前要在干燥器中将多肽恢复到室温避免多肽吸水。可以在4℃短期保存，一旦溶解了多肽，长时间的溶液保存会造成缓慢的多肽降解，如Cys、Met、Trp的氧化和Gln的脱酰胺化，此外Cys会形成彼此间或者内部的二硫键。
  24. 我怎样溶解我拿到的多肽？
    多肽的溶解性和它的序列有关，Abgent的多肽产品同时还包括多肽的分析数据以及建议溶剂的信息。通常溶解酸性多肽使用10%碳酸氢铵溶液，碱性多肽使用30%乙酸，疏水性多肽使用少量DMSO。对于水溶性不好的多肽，可以使用有机溶剂，如DMSO、DMF、DMA、异丙醇和甲醇等。
  25. 蛋白上的标签是否会影响抗体制备？
    通常重组蛋白上的GST（谷胱甘肽S-转移酶）或MBP（麦芽糖结合蛋白）标签分子量较大，含有许多抗原位点，在免疫时会成为抗原从而影响特异性抗体的制备。所以作为抗原的重组蛋白最好不带有GST或MBP标签。一些小分子量的标签，如His、Myc、Flag基本不会影响特异性抗体的制备。Abgent用于制备抗体的蛋白通常采用此类小分子量标签。
  26. 能否比较一下蛋白表达纯化时使用细菌和昆虫/病毒的区别？
    在制备重组蛋白时，通常情况下E.coli的表达系统优于病毒和昆虫的。主要的区别在于需要表达的蛋白的性质、使用的表达载体、E.coli的菌株或者细胞株。根据我们的经验，从1000毫升E.coli的培养菌液中能纯化出10-100毫克重组蛋白，但病毒或者昆虫表达系统只能得到数百微克。
  27. 如果我想提供抗原让Abgent制备抗体，需要提供多少抗原？
    1. 如果您的抗原是合成多肽，通常需要5mg以上。对于需要做亲和纯化的项目，需要额外提供3-4mg多肽。提供的多肽要求是冻干粉。
    2. 如果抗原是蛋白，建议您提供3-5mg浓度为1mg/ml以上的蛋白并注明蛋白保存的缓冲液和蛋白浓度。对于需要做亲和纯化的项目，需要额外提供3-4mg蛋白用于亲和纯化。
    该量同时适用于单抗和多抗的常规制备。
  28. 如果我想定制一个抗体，但我想让Abgent为我进行多肽设计，我想知道多肽设计是怎样进行的？
    我们会对您所要制备抗体的蛋白全长序列进行分析，来设计1-5条多肽。多肽的亲水性、疏水性、空间结构、β折叠倾向、同源性以及多肽长度（通常10-20个氨基酸）在多肽设计时都会考虑在内，确保多肽最好的免疫原性。客户的意见和合成的方便程度也是多肽设计时需要考虑的。
  29. 单克隆抗体制备项目中客户能获得不同克隆吗？
    我们的制备服务出于为客户节省成本考虑，不同的套餐有不同的价格，请您根据自己的需要选择。比如我们的单克隆抗体制备可以根据您需要的的克隆数调整套餐价格。
  30. 你们的抗体制备是否保证阳性结果？
    我们的抗体制备一般都保证ELISA结果在1：4000以上，WB、IHC等检测结果受抗原影响比较大，抗原是多肽还是蛋白、多肽抗原的设计、抗原的纯度等等都会影响抗体的质量。
    另外在我们的制备服务中有一种服务可以保证WB或IHC阳性结果，我们会针对您的全蛋白设计3段抗原位点，启动三个抗体制备项目，这样，我们至少可以保证一个项目的成功。当然，您可以以远低于3倍单个项目的价格获得这项服务。
  31. 在订单上，抗体的制备流程是固定期限的，我想缩短这个流程可不可以？
    我们可以根据客户的建议改变抗体制备流程，但我们并不推荐您这样做。我们的流程是根据我们长期的经验和实验结果来制定的，我们会尽最大努力给客户提供最好的产品。
  32. 如果我想提前终止还未结束的多克隆抗体定制项目，费用如何计算？
    对于客户定制的多克隆抗体项目，我们会采集免疫前的血清小样和免疫后第五周的血清小样提供给客户进行检测评估。如果您在免疫后第五周之前终止项目，需要支付订单上50%的费用，如果超过第五周，您需要支付全部费用。